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Tris饱和酚配制及作用

Tris饱和酚是用Tris-HCl(pH8.0)饱和过的重蒸酚,为浅黄色透明液体,有刺激性气味,上层为Tris 盐酸缓冲液,pH>7.8,下层为酚相,内加有抗氧化的8-羟基喹啉。Tris饱和酚用于分离DNA。

 

  Tris饱和酚是用Tris-HCl(pH8.0)饱和过的重蒸酚,为浅黄色透明液体,有刺激性气味,上层为Tris 盐酸缓冲液,pH>7.8,下层为酚相,内加有抗氧化的8-羟基喹啉。Tris饱和酚用于分离 DNA。

 

  Tris饱和酚的配置:冰箱取出重蒸酚,室温放置,之后68度水浴溶化,切勿立即放入68度的水浴中,以防玻璃炸裂,加8-羟基喹啉至0.1%和β-巯基乙醇至0.2%,(原液14.4MOL/ML),混匀,溶液呈现黄色,倒入分液漏斗中(也可在烧杯中进行)加入等溶剂的1MOL/ML的Tris(PH8.0),反复混匀后,静至分层;放出下层黄色酚液,弃上层、加固体Tris 约 1g/100ml,摇匀,去水相、加 0.1MOL/ML Tris(PH8.0)平衡数次,至 PH 为 8.0、0.1MOL/ML Tris(PH8.0)于棕色瓶中4 度保存。

 

  组织裂解液,确保pH为8.0左右(可加入0.1体积的1M Tris-HCl,pH8.0,将其调为8.0左右),再加入0.5体积的Tris饱和酚(使用时静置,取下层酚相使用。上层为Tris-HCl溶液,是为阻止酚与空气接触,以减缓酚的氧化),0.5 体积氯仿:异戊醇(24:1) ,振荡10秒钟后冰浴15分钟。离心后取水相(上层)加等体积异丙醇沉淀 DNA,75%乙醇漂洗1次,微干燥后溶于适量TE中备用。

 

  Tris饱和酚一般PH大于7.8,用于DNA 的提取。其中,酚是强的蛋白变性剂,可以使细胞或组织中的蛋白质变性析出,而Tris的主要作用是防治止酚类氧化,若酚类氧化,则会形成醌(两个苯环),醌含有强自由基,会破坏核酸结构。同时,由于PH值大于7,在碱性环境中DNA处于水相,RNA处于有机相,从而分离上清,即可得到 DNA。

 

  Tris平衡酚有较强的腐蚀性,应尽量避免皮肤接触或吸入体内。如发现变为红色或棕色,表明已发生氧化,不能继续使用。


  素材来源于网络。

  想了解更多生化试剂知识,敬请关注“湖南韵邦生物医药有限公司”官方网站:http://www.hunanyunbang.com/

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Tris饱和酚配制及作用

作者:湖南韵邦生物医药有限公司 浏览: 发表时间:2020-11-27 14:30:08

Tris饱和酚是用Tris-HCl(pH8.0)饱和过的重蒸酚,为浅黄色透明液体,有刺激性气味,上层为Tris 盐酸缓冲液,pH>7.8,下层为酚相,内加有抗氧化的8-羟基喹啉。Tris饱和酚用于分离DNA。

 

  Tris饱和酚是用Tris-HCl(pH8.0)饱和过的重蒸酚,为浅黄色透明液体,有刺激性气味,上层为Tris 盐酸缓冲液,pH>7.8,下层为酚相,内加有抗氧化的8-羟基喹啉。Tris饱和酚用于分离 DNA。

 

  Tris饱和酚的配置:冰箱取出重蒸酚,室温放置,之后68度水浴溶化,切勿立即放入68度的水浴中,以防玻璃炸裂,加8-羟基喹啉至0.1%和β-巯基乙醇至0.2%,(原液14.4MOL/ML),混匀,溶液呈现黄色,倒入分液漏斗中(也可在烧杯中进行)加入等溶剂的1MOL/ML的Tris(PH8.0),反复混匀后,静至分层;放出下层黄色酚液,弃上层、加固体Tris 约 1g/100ml,摇匀,去水相、加 0.1MOL/ML Tris(PH8.0)平衡数次,至 PH 为 8.0、0.1MOL/ML Tris(PH8.0)于棕色瓶中4 度保存。

 

  组织裂解液,确保pH为8.0左右(可加入0.1体积的1M Tris-HCl,pH8.0,将其调为8.0左右),再加入0.5体积的Tris饱和酚(使用时静置,取下层酚相使用。上层为Tris-HCl溶液,是为阻止酚与空气接触,以减缓酚的氧化),0.5 体积氯仿:异戊醇(24:1) ,振荡10秒钟后冰浴15分钟。离心后取水相(上层)加等体积异丙醇沉淀 DNA,75%乙醇漂洗1次,微干燥后溶于适量TE中备用。

 

  Tris饱和酚一般PH大于7.8,用于DNA 的提取。其中,酚是强的蛋白变性剂,可以使细胞或组织中的蛋白质变性析出,而Tris的主要作用是防治止酚类氧化,若酚类氧化,则会形成醌(两个苯环),醌含有强自由基,会破坏核酸结构。同时,由于PH值大于7,在碱性环境中DNA处于水相,RNA处于有机相,从而分离上清,即可得到 DNA。

 

  Tris平衡酚有较强的腐蚀性,应尽量避免皮肤接触或吸入体内。如发现变为红色或棕色,表明已发生氧化,不能继续使用。


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Tris饱和酚配制及作用

作者:湖南韵邦生物医药有限公司 浏览: 发表时间:2020-11-27 14:30:08

Tris饱和酚是用Tris-HCl(pH8.0)饱和过的重蒸酚,为浅黄色透明液体,有刺激性气味,上层为Tris 盐酸缓冲液,pH>7.8,下层为酚相,内加有抗氧化的8-羟基喹啉。Tris饱和酚用于分离DNA。

 

  Tris饱和酚是用Tris-HCl(pH8.0)饱和过的重蒸酚,为浅黄色透明液体,有刺激性气味,上层为Tris 盐酸缓冲液,pH>7.8,下层为酚相,内加有抗氧化的8-羟基喹啉。Tris饱和酚用于分离 DNA。

 

  Tris饱和酚的配置:冰箱取出重蒸酚,室温放置,之后68度水浴溶化,切勿立即放入68度的水浴中,以防玻璃炸裂,加8-羟基喹啉至0.1%和β-巯基乙醇至0.2%,(原液14.4MOL/ML),混匀,溶液呈现黄色,倒入分液漏斗中(也可在烧杯中进行)加入等溶剂的1MOL/ML的Tris(PH8.0),反复混匀后,静至分层;放出下层黄色酚液,弃上层、加固体Tris 约 1g/100ml,摇匀,去水相、加 0.1MOL/ML Tris(PH8.0)平衡数次,至 PH 为 8.0、0.1MOL/ML Tris(PH8.0)于棕色瓶中4 度保存。

 

  组织裂解液,确保pH为8.0左右(可加入0.1体积的1M Tris-HCl,pH8.0,将其调为8.0左右),再加入0.5体积的Tris饱和酚(使用时静置,取下层酚相使用。上层为Tris-HCl溶液,是为阻止酚与空气接触,以减缓酚的氧化),0.5 体积氯仿:异戊醇(24:1) ,振荡10秒钟后冰浴15分钟。离心后取水相(上层)加等体积异丙醇沉淀 DNA,75%乙醇漂洗1次,微干燥后溶于适量TE中备用。

 

  Tris饱和酚一般PH大于7.8,用于DNA 的提取。其中,酚是强的蛋白变性剂,可以使细胞或组织中的蛋白质变性析出,而Tris的主要作用是防治止酚类氧化,若酚类氧化,则会形成醌(两个苯环),醌含有强自由基,会破坏核酸结构。同时,由于PH值大于7,在碱性环境中DNA处于水相,RNA处于有机相,从而分离上清,即可得到 DNA。

 

  Tris平衡酚有较强的腐蚀性,应尽量避免皮肤接触或吸入体内。如发现变为红色或棕色,表明已发生氧化,不能继续使用。


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Tris饱和酚配制及作用

作者:湖南韵邦生物医药有限公司 浏览: 发表时间:2020-11-27 14:30:08

Tris饱和酚是用Tris-HCl(pH8.0)饱和过的重蒸酚,为浅黄色透明液体,有刺激性气味,上层为Tris 盐酸缓冲液,pH>7.8,下层为酚相,内加有抗氧化的8-羟基喹啉。Tris饱和酚用于分离DNA。

 

  Tris饱和酚是用Tris-HCl(pH8.0)饱和过的重蒸酚,为浅黄色透明液体,有刺激性气味,上层为Tris 盐酸缓冲液,pH>7.8,下层为酚相,内加有抗氧化的8-羟基喹啉。Tris饱和酚用于分离 DNA。

 

  Tris饱和酚的配置:冰箱取出重蒸酚,室温放置,之后68度水浴溶化,切勿立即放入68度的水浴中,以防玻璃炸裂,加8-羟基喹啉至0.1%和β-巯基乙醇至0.2%,(原液14.4MOL/ML),混匀,溶液呈现黄色,倒入分液漏斗中(也可在烧杯中进行)加入等溶剂的1MOL/ML的Tris(PH8.0),反复混匀后,静至分层;放出下层黄色酚液,弃上层、加固体Tris 约 1g/100ml,摇匀,去水相、加 0.1MOL/ML Tris(PH8.0)平衡数次,至 PH 为 8.0、0.1MOL/ML Tris(PH8.0)于棕色瓶中4 度保存。

 

  组织裂解液,确保pH为8.0左右(可加入0.1体积的1M Tris-HCl,pH8.0,将其调为8.0左右),再加入0.5体积的Tris饱和酚(使用时静置,取下层酚相使用。上层为Tris-HCl溶液,是为阻止酚与空气接触,以减缓酚的氧化),0.5 体积氯仿:异戊醇(24:1) ,振荡10秒钟后冰浴15分钟。离心后取水相(上层)加等体积异丙醇沉淀 DNA,75%乙醇漂洗1次,微干燥后溶于适量TE中备用。

 

  Tris饱和酚一般PH大于7.8,用于DNA 的提取。其中,酚是强的蛋白变性剂,可以使细胞或组织中的蛋白质变性析出,而Tris的主要作用是防治止酚类氧化,若酚类氧化,则会形成醌(两个苯环),醌含有强自由基,会破坏核酸结构。同时,由于PH值大于7,在碱性环境中DNA处于水相,RNA处于有机相,从而分离上清,即可得到 DNA。

 

  Tris平衡酚有较强的腐蚀性,应尽量避免皮肤接触或吸入体内。如发现变为红色或棕色,表明已发生氧化,不能继续使用。


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Tris饱和酚配制及作用

作者:湖南韵邦生物医药有限公司 浏览: 发表时间:2020-11-27 14:30:08

Tris饱和酚是用Tris-HCl(pH8.0)饱和过的重蒸酚,为浅黄色透明液体,有刺激性气味,上层为Tris 盐酸缓冲液,pH>7.8,下层为酚相,内加有抗氧化的8-羟基喹啉。Tris饱和酚用于分离DNA。

 

  Tris饱和酚是用Tris-HCl(pH8.0)饱和过的重蒸酚,为浅黄色透明液体,有刺激性气味,上层为Tris 盐酸缓冲液,pH>7.8,下层为酚相,内加有抗氧化的8-羟基喹啉。Tris饱和酚用于分离 DNA。

 

  Tris饱和酚的配置:冰箱取出重蒸酚,室温放置,之后68度水浴溶化,切勿立即放入68度的水浴中,以防玻璃炸裂,加8-羟基喹啉至0.1%和β-巯基乙醇至0.2%,(原液14.4MOL/ML),混匀,溶液呈现黄色,倒入分液漏斗中(也可在烧杯中进行)加入等溶剂的1MOL/ML的Tris(PH8.0),反复混匀后,静至分层;放出下层黄色酚液,弃上层、加固体Tris 约 1g/100ml,摇匀,去水相、加 0.1MOL/ML Tris(PH8.0)平衡数次,至 PH 为 8.0、0.1MOL/ML Tris(PH8.0)于棕色瓶中4 度保存。

 

  组织裂解液,确保pH为8.0左右(可加入0.1体积的1M Tris-HCl,pH8.0,将其调为8.0左右),再加入0.5体积的Tris饱和酚(使用时静置,取下层酚相使用。上层为Tris-HCl溶液,是为阻止酚与空气接触,以减缓酚的氧化),0.5 体积氯仿:异戊醇(24:1) ,振荡10秒钟后冰浴15分钟。离心后取水相(上层)加等体积异丙醇沉淀 DNA,75%乙醇漂洗1次,微干燥后溶于适量TE中备用。

 

  Tris饱和酚一般PH大于7.8,用于DNA 的提取。其中,酚是强的蛋白变性剂,可以使细胞或组织中的蛋白质变性析出,而Tris的主要作用是防治止酚类氧化,若酚类氧化,则会形成醌(两个苯环),醌含有强自由基,会破坏核酸结构。同时,由于PH值大于7,在碱性环境中DNA处于水相,RNA处于有机相,从而分离上清,即可得到 DNA。

 

  Tris平衡酚有较强的腐蚀性,应尽量避免皮肤接触或吸入体内。如发现变为红色或棕色,表明已发生氧化,不能继续使用。


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