湖南韵邦生物医药有限公司
Hunan Yunbang Bio-pharmaceutical Co., Ltd.

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谈谈CAPS在蛋白质转膜实验中的应用



CAPS是,全称3-(环己胺)-1-丙磺酸,一种有机化学物质,白色结晶粉末,CAS号1135-40-6,是一种生物缓冲剂,常用在生化诊断试剂盒、DNA/RNA提取试剂盒及PCR诊断试剂盒。用于酶化学及HPLC分离碱性药物的缓冲液,在蛋白测序的转膜过程中应用广泛。CAPS缓冲液由CAPS、去离子水组成,调PH到11.0,用于纤连蛋白的纯化。


操作要点

1、SDS-PAGE电泳按常规条件进行(CAPS系统用于>=20KD蛋白Tris-Tricine系统用于低分子量蛋白,也可用于高分子量蛋白)

2、甲醇浓度CAPS电印迹缓冲液中甲醇浓度范围是0-20%(甲醇浓度高,用于低分子量蛋白转印甲醇浓度低甚至不含甲醇的用于高分子量蛋白的转印

3、PVDF膜处理取出PVDF膜,用甲醇浸泡数秒钟,然后放入CAPS电印迹缓冲液中(注此后的操作须防止PVDF膜干涸如果膜变干,须重复本步骤的操作)

4、凝胶处理取出电泳凝胶,在CAPS缓冲液中浸泡5-10分钟(注转移某些强碱性蛋白pI>9.0时,可省略本步骤)

5、安装转印槽子将滤纸和海绵放入电印迹缓冲液中浸泡一下,然后按海绵、滤纸、PVDF膜、凝胶、滤纸、海绵的次序将电印迹夹层装好,并放入小型电转槽中

6、转印条件50V恒压条件下(100-170mA)于室温下进行电印迹转移,转移时间为0.5-2小时(注务必排尽凝胶和PVDF膜之间的气泡例如对70kD以上的蛋白质须延长转移时间)

7、PVDF膜染色前处理取出PVDF膜并用去离子水略为漂洗,用甲醇浸泡数秒钟,然后进行染色

8、膜染色考马斯亮蓝染色(将0.1%考马斯亮蓝R-250溶于40%甲醇/1%乙酸中)30-50秒(切勿超过1分钟),50%甲醇脱色(勤换脱色液),用去离子水充分洗涤,然后晾干即可


CAPS缓冲液配制

1、10xCAPS(100mmol/L)缓冲液配制,方法如下CAPS,22.13g加去离子水到900ml2mol/L NaOH(约20ml)将pH值调到11.0,然后定容到1L,贮存于4C

2、CAPS电印迹缓冲液(含10%甲醇的1*CAPS)配制,方法如下10xCAPS 200ml加入甲醇200ml加入去离子水1600ml即可


其他应用

CAPS还是制造焊接材料、空调设备和制造的原料还用于制造烟火用作分析试剂、热交换载体,也用于制药工业用于空气调节、烟火、干电池也用作助焊剂、干燥剂针对涂料行业,用于水性异氢酸酯固化剂。湖南韵邦研发生产各种生物缓冲剂,包括CAPS、TRIS、BICINE、MOPS等,纯度高>99%,工艺稳定,欢迎各位详询

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谈谈CAPS在蛋白质转膜实验中的应用

作者:湖南韵邦生物医药有限公司 浏览: 发表时间:2021-10-28 10:51:21


CAPS是,全称3-(环己胺)-1-丙磺酸,一种有机化学物质,白色结晶粉末,CAS号1135-40-6,是一种生物缓冲剂,常用在生化诊断试剂盒、DNA/RNA提取试剂盒及PCR诊断试剂盒。用于酶化学及HPLC分离碱性药物的缓冲液,在蛋白测序的转膜过程中应用广泛。CAPS缓冲液由CAPS、去离子水组成,调PH到11.0,用于纤连蛋白的纯化。


操作要点

1、SDS-PAGE电泳按常规条件进行(CAPS系统用于>=20KD蛋白Tris-Tricine系统用于低分子量蛋白,也可用于高分子量蛋白)

2、甲醇浓度CAPS电印迹缓冲液中甲醇浓度范围是0-20%(甲醇浓度高,用于低分子量蛋白转印甲醇浓度低甚至不含甲醇的用于高分子量蛋白的转印

3、PVDF膜处理取出PVDF膜,用甲醇浸泡数秒钟,然后放入CAPS电印迹缓冲液中(注此后的操作须防止PVDF膜干涸如果膜变干,须重复本步骤的操作)

4、凝胶处理取出电泳凝胶,在CAPS缓冲液中浸泡5-10分钟(注转移某些强碱性蛋白pI>9.0时,可省略本步骤)

5、安装转印槽子将滤纸和海绵放入电印迹缓冲液中浸泡一下,然后按海绵、滤纸、PVDF膜、凝胶、滤纸、海绵的次序将电印迹夹层装好,并放入小型电转槽中

6、转印条件50V恒压条件下(100-170mA)于室温下进行电印迹转移,转移时间为0.5-2小时(注务必排尽凝胶和PVDF膜之间的气泡例如对70kD以上的蛋白质须延长转移时间)

7、PVDF膜染色前处理取出PVDF膜并用去离子水略为漂洗,用甲醇浸泡数秒钟,然后进行染色

8、膜染色考马斯亮蓝染色(将0.1%考马斯亮蓝R-250溶于40%甲醇/1%乙酸中)30-50秒(切勿超过1分钟),50%甲醇脱色(勤换脱色液),用去离子水充分洗涤,然后晾干即可


CAPS缓冲液配制

1、10xCAPS(100mmol/L)缓冲液配制,方法如下CAPS,22.13g加去离子水到900ml2mol/L NaOH(约20ml)将pH值调到11.0,然后定容到1L,贮存于4C

2、CAPS电印迹缓冲液(含10%甲醇的1*CAPS)配制,方法如下10xCAPS 200ml加入甲醇200ml加入去离子水1600ml即可


其他应用

CAPS还是制造焊接材料、空调设备和制造的原料还用于制造烟火用作分析试剂、热交换载体,也用于制药工业用于空气调节、烟火、干电池也用作助焊剂、干燥剂针对涂料行业,用于水性异氢酸酯固化剂。湖南韵邦研发生产各种生物缓冲剂,包括CAPS、TRIS、BICINE、MOPS等,纯度高>99%,工艺稳定,欢迎各位详询

谈谈CAPS在蛋白质转膜实验中的应用

作者:湖南韵邦生物医药有限公司 浏览: 发表时间:2021-10-28 10:51:21


CAPS是,全称3-(环己胺)-1-丙磺酸,一种有机化学物质,白色结晶粉末,CAS号1135-40-6,是一种生物缓冲剂,常用在生化诊断试剂盒、DNA/RNA提取试剂盒及PCR诊断试剂盒。用于酶化学及HPLC分离碱性药物的缓冲液,在蛋白测序的转膜过程中应用广泛。CAPS缓冲液由CAPS、去离子水组成,调PH到11.0,用于纤连蛋白的纯化。


操作要点

1、SDS-PAGE电泳按常规条件进行(CAPS系统用于>=20KD蛋白Tris-Tricine系统用于低分子量蛋白,也可用于高分子量蛋白)

2、甲醇浓度CAPS电印迹缓冲液中甲醇浓度范围是0-20%(甲醇浓度高,用于低分子量蛋白转印甲醇浓度低甚至不含甲醇的用于高分子量蛋白的转印

3、PVDF膜处理取出PVDF膜,用甲醇浸泡数秒钟,然后放入CAPS电印迹缓冲液中(注此后的操作须防止PVDF膜干涸如果膜变干,须重复本步骤的操作)

4、凝胶处理取出电泳凝胶,在CAPS缓冲液中浸泡5-10分钟(注转移某些强碱性蛋白pI>9.0时,可省略本步骤)

5、安装转印槽子将滤纸和海绵放入电印迹缓冲液中浸泡一下,然后按海绵、滤纸、PVDF膜、凝胶、滤纸、海绵的次序将电印迹夹层装好,并放入小型电转槽中

6、转印条件50V恒压条件下(100-170mA)于室温下进行电印迹转移,转移时间为0.5-2小时(注务必排尽凝胶和PVDF膜之间的气泡例如对70kD以上的蛋白质须延长转移时间)

7、PVDF膜染色前处理取出PVDF膜并用去离子水略为漂洗,用甲醇浸泡数秒钟,然后进行染色

8、膜染色考马斯亮蓝染色(将0.1%考马斯亮蓝R-250溶于40%甲醇/1%乙酸中)30-50秒(切勿超过1分钟),50%甲醇脱色(勤换脱色液),用去离子水充分洗涤,然后晾干即可


CAPS缓冲液配制

1、10xCAPS(100mmol/L)缓冲液配制,方法如下CAPS,22.13g加去离子水到900ml2mol/L NaOH(约20ml)将pH值调到11.0,然后定容到1L,贮存于4C

2、CAPS电印迹缓冲液(含10%甲醇的1*CAPS)配制,方法如下10xCAPS 200ml加入甲醇200ml加入去离子水1600ml即可


其他应用

CAPS还是制造焊接材料、空调设备和制造的原料还用于制造烟火用作分析试剂、热交换载体,也用于制药工业用于空气调节、烟火、干电池也用作助焊剂、干燥剂针对涂料行业,用于水性异氢酸酯固化剂。湖南韵邦研发生产各种生物缓冲剂,包括CAPS、TRIS、BICINE、MOPS等,纯度高>99%,工艺稳定,欢迎各位详询

谈谈CAPS在蛋白质转膜实验中的应用

作者:湖南韵邦生物医药有限公司 浏览: 发表时间:2021-10-28 10:51:21


CAPS是,全称3-(环己胺)-1-丙磺酸,一种有机化学物质,白色结晶粉末,CAS号1135-40-6,是一种生物缓冲剂,常用在生化诊断试剂盒、DNA/RNA提取试剂盒及PCR诊断试剂盒。用于酶化学及HPLC分离碱性药物的缓冲液,在蛋白测序的转膜过程中应用广泛。CAPS缓冲液由CAPS、去离子水组成,调PH到11.0,用于纤连蛋白的纯化。


操作要点

1、SDS-PAGE电泳按常规条件进行(CAPS系统用于>=20KD蛋白Tris-Tricine系统用于低分子量蛋白,也可用于高分子量蛋白)

2、甲醇浓度CAPS电印迹缓冲液中甲醇浓度范围是0-20%(甲醇浓度高,用于低分子量蛋白转印甲醇浓度低甚至不含甲醇的用于高分子量蛋白的转印

3、PVDF膜处理取出PVDF膜,用甲醇浸泡数秒钟,然后放入CAPS电印迹缓冲液中(注此后的操作须防止PVDF膜干涸如果膜变干,须重复本步骤的操作)

4、凝胶处理取出电泳凝胶,在CAPS缓冲液中浸泡5-10分钟(注转移某些强碱性蛋白pI>9.0时,可省略本步骤)

5、安装转印槽子将滤纸和海绵放入电印迹缓冲液中浸泡一下,然后按海绵、滤纸、PVDF膜、凝胶、滤纸、海绵的次序将电印迹夹层装好,并放入小型电转槽中

6、转印条件50V恒压条件下(100-170mA)于室温下进行电印迹转移,转移时间为0.5-2小时(注务必排尽凝胶和PVDF膜之间的气泡例如对70kD以上的蛋白质须延长转移时间)

7、PVDF膜染色前处理取出PVDF膜并用去离子水略为漂洗,用甲醇浸泡数秒钟,然后进行染色

8、膜染色考马斯亮蓝染色(将0.1%考马斯亮蓝R-250溶于40%甲醇/1%乙酸中)30-50秒(切勿超过1分钟),50%甲醇脱色(勤换脱色液),用去离子水充分洗涤,然后晾干即可


CAPS缓冲液配制

1、10xCAPS(100mmol/L)缓冲液配制,方法如下CAPS,22.13g加去离子水到900ml2mol/L NaOH(约20ml)将pH值调到11.0,然后定容到1L,贮存于4C

2、CAPS电印迹缓冲液(含10%甲醇的1*CAPS)配制,方法如下10xCAPS 200ml加入甲醇200ml加入去离子水1600ml即可


其他应用

CAPS还是制造焊接材料、空调设备和制造的原料还用于制造烟火用作分析试剂、热交换载体,也用于制药工业用于空气调节、烟火、干电池也用作助焊剂、干燥剂针对涂料行业,用于水性异氢酸酯固化剂。湖南韵邦研发生产各种生物缓冲剂,包括CAPS、TRIS、BICINE、MOPS等,纯度高>99%,工艺稳定,欢迎各位详询

谈谈CAPS在蛋白质转膜实验中的应用

作者:湖南韵邦生物医药有限公司 浏览: 发表时间:2021-10-28 10:51:21


CAPS是,全称3-(环己胺)-1-丙磺酸,一种有机化学物质,白色结晶粉末,CAS号1135-40-6,是一种生物缓冲剂,常用在生化诊断试剂盒、DNA/RNA提取试剂盒及PCR诊断试剂盒。用于酶化学及HPLC分离碱性药物的缓冲液,在蛋白测序的转膜过程中应用广泛。CAPS缓冲液由CAPS、去离子水组成,调PH到11.0,用于纤连蛋白的纯化。


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1、SDS-PAGE电泳按常规条件进行(CAPS系统用于>=20KD蛋白Tris-Tricine系统用于低分子量蛋白,也可用于高分子量蛋白)

2、甲醇浓度CAPS电印迹缓冲液中甲醇浓度范围是0-20%(甲醇浓度高,用于低分子量蛋白转印甲醇浓度低甚至不含甲醇的用于高分子量蛋白的转印

3、PVDF膜处理取出PVDF膜,用甲醇浸泡数秒钟,然后放入CAPS电印迹缓冲液中(注此后的操作须防止PVDF膜干涸如果膜变干,须重复本步骤的操作)

4、凝胶处理取出电泳凝胶,在CAPS缓冲液中浸泡5-10分钟(注转移某些强碱性蛋白pI>9.0时,可省略本步骤)

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6、转印条件50V恒压条件下(100-170mA)于室温下进行电印迹转移,转移时间为0.5-2小时(注务必排尽凝胶和PVDF膜之间的气泡例如对70kD以上的蛋白质须延长转移时间)

7、PVDF膜染色前处理取出PVDF膜并用去离子水略为漂洗,用甲醇浸泡数秒钟,然后进行染色

8、膜染色考马斯亮蓝染色(将0.1%考马斯亮蓝R-250溶于40%甲醇/1%乙酸中)30-50秒(切勿超过1分钟),50%甲醇脱色(勤换脱色液),用去离子水充分洗涤,然后晾干即可


CAPS缓冲液配制

1、10xCAPS(100mmol/L)缓冲液配制,方法如下CAPS,22.13g加去离子水到900ml2mol/L NaOH(约20ml)将pH值调到11.0,然后定容到1L,贮存于4C

2、CAPS电印迹缓冲液(含10%甲醇的1*CAPS)配制,方法如下10xCAPS 200ml加入甲醇200ml加入去离子水1600ml即可


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CAPS还是制造焊接材料、空调设备和制造的原料还用于制造烟火用作分析试剂、热交换载体,也用于制药工业用于空气调节、烟火、干电池也用作助焊剂、干燥剂针对涂料行业,用于水性异氢酸酯固化剂。湖南韵邦研发生产各种生物缓冲剂,包括CAPS、TRIS、BICINE、MOPS等,纯度高>99%,工艺稳定,欢迎各位详询

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